一、竞赛时间 

2015年11月17日中午13:00初赛，11月18日下午3：00决赛。

二、竞赛地点 

西实验楼一楼微生物实验室

   三、参赛对象 

本次竞赛针对食品营养与检测、食品营养与检测（质安）和食品加工技术专业14级学生。

四、竞赛项目

设有常见细菌鉴别、食品中菌落总数测定两个竞赛项目。每位参赛选手现场抽签选择竞赛项目。

五、奖项设立

   比赛分初赛和决赛。初赛形式为笔试，时间15分钟。决赛形式为技能操作，人数为30人。个人奖项分别是一等奖3人，二等奖为6人，三等奖9人，其余为优秀奖。奖品分别是一等奖32G优盘、二等奖16G优盘和三等奖8G优盘。 

六、竞赛内容与评分标准：

比赛时间为30分钟。

（一）常见细菌鉴别项目：有两管菌种，一管为金黄色葡萄球菌，一管为大肠杆菌，但标签已脱落，请通过革兰氏染色试验将其分开。

1、涂片、干燥、固定

（1）取一块洁净载玻片，分别在载玻片中央滴一滴生理盐水，用无菌操作分别挑取菌种于载玻片的水滴中，调匀涂成薄膜，直径1.5cm左右。

（2）室温干燥或电吹风吹干。

（3）涂片面上，在酒精灯上过火三次，使细胞质凝固，以固定细菌的形态，并使其不易脱落。

2、染色

（1）初染加草酸铵结晶紫染色液染色1-2分钟，用水冲洗。

（2）媒染滴加碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟，水洗。

（3）脱色将载玻片上的水甩干净，在载玻片下衬以白色背景，滴加95%的酒精脱色，直洗至流出的酒精刚刚不出现紫色为止（0.5分钟），立即用水冲洗酒精。

（4）复染用番红染液染1-2分钟，水洗。

3、镜检干燥后，置显微镜下观察。

4、报告

球状、染成紫色者为金黄色葡萄球菌，杆状、染成红色者为大肠杆菌。

（二）食品中菌落总数测定中样品稀释与培养：

1、实验准备（由竞赛组委会老师完成）

（1）酱油

（2）1ml与10ml吸管将吸管洗净烘干，塞入少量脱脂棉，卷好防潮纸将口部包好，同上述材料一起进行灭菌。

（3）平皿将平皿分为5个一卷，用防潮纸包好，同吸管一起灭菌。

（4）培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。将培养基调制pH7.2-7.4，装入三角瓶，进行灭菌，保温45℃备用。

2、样品稀释与培养

（1）用10ml无菌吸管将酱油样品注入90ml无菌生理盐水内，充分摇匀，做成1:10的稀释液，应严格无菌操作。

（2）用1ml无菌吸管，吸取1:10稀释液1ml，注入含有9ml无菌生理盐水的试管内，振荡试管混合均匀，做成1:100的稀释液。

（3）同样操作，配成1:1000和1:10000的稀释液。

（4）取三支1ml无菌吸管（或由稀释度低到高），分别吸取三个稀释度各1ml于平皿内，每个稀释度做两个平皿。

（5）立即将45摄氏度的培养基注入平皿，并转动平皿，使其混合均匀。

（6）待琼脂凝固后，翻转平皿，置于37℃恒温箱内培养24小时后取出。

现场操作不符合要求扣分范围： 

   1.未注意无菌操作的；

   2.有超过规定竞赛时间情形的；

监理工作人员负责现场记录，由上述情形出现的记录交给评分组，作为扣分依据。 

（三）具体评分标准见附件1、附件2 

七、技能大赛其他要求

   1.参赛选手应严格遵守赛场纪律，服从指挥，仪表端庄，讲文明礼貌。各队之间应讲团结、友好、协作，避免各种矛盾发生。

   2.赛前，各选手可参观竞赛场地、设备。

   3.参赛选手提前30分钟到达比赛现场检录，迟到超过30分钟的选手不得入场。

   4.参赛选手应衣着整洁，穿工作服。比赛结束后清理好操作台，否则酌情扣分。

   5.参赛选手须服从裁判。

   6.每班设领队1名，统一管理参赛选手，协调参赛事宜。

附件1

细菌鉴别组比赛规则和评分标准

（一）比赛内容：细菌鉴别（革兰氏染色）

（二）比赛分数：100分

（三）比赛要求

1、无菌操作：要求选手在比赛过程中注意无菌操作意识，符合无菌操作要求。

2、实验操作：动作连绵、轻柔、圆和，程序设计合理，全过程完整流畅。

3、穿着：要求穿白大衣。

微生物检验技术（细菌鉴别）职业技能大赛（操作技能）评分表

 

总分100分：_______________

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

附件2

菌落总数组比赛规则和评分标准

（一）比赛内容：菌落总数测定（样品稀释与培养）

（二）比赛分数：100分

（三）比赛要求

1、无菌操作：要求选手在比赛过程中注意无菌操作意识，符合无菌操作要求。

2、实验操作：动作连绵、轻柔、圆和，程序设计合理，全过程完整流畅。

3、穿着：要求穿白大衣。

微生物检验技术（细菌鉴别）职业技能大赛（操作技能）评分表

 

总分100分：_ _       _